Borrelia ADN-PCR din LCR

Borrelia burgdorferi – ADN prin PCR din lichidul cefalorahidian (LCR)

Ce este neuroborrelioza

Boala Lyme (borrelioza Lyme) este o infecție produsă de spirochete din complexul Borrelia burgdorferi sensu lato, transmisă prin mușcătura de căpușă. Mai multe despre boală găsiți în articolul Borrelioza sau boala Lyme.

Speciile de Borrelia din Europa:

• B. afzelii și B. garinii sunt speciile principale;
• mai pot apărea B. burgdorferi sensu stricto, B. bavariensis și B. spielmanii;
• B. garinii și B. bavariensis sunt asociate mai ales cu manifestările neurologice.

Cum evoluează boala:

• stadiul precoce localizat: eritemul migrator, o pată roșie care se extinde treptat la locul mușcăturii și apare la 3–30 de zile după aceasta. Mulți pacienți nu își amintesc mușcătura;
• stadiul precoce diseminat apare la câteva săptămâni până la câteva luni de la infecție:
  • pot apărea eriteme multiple, febră, dureri musculare și articulare;
  • neuroborrelioza apare la aproximativ 10% dintre cazuri, de obicei la 6–12 săptămâni de la infecție. Se manifestă prin paralizie facială (și alte nevrite craniene), meningită limfocitară și radiculonevrită;
  • mai rar apare cardita Lyme, cu tulburări de ritm și de conducere;
• stadiul tardiv: artrita Lyme, care afectează de obicei o articulație mare (genunchiul), și acrodermatita cronică atrofiantă, care se poate însoți de neuropatie.

Cum se pune diagnosticul de neuroborrelioză. Diagnosticul se bazează în principal pe metode serologice (indirecte), care arată producția de anticorpi anti-Borrelia în sistemul nervos central (producție intratecală). Pentru aceasta, anticorpii se determină simultan în ser și în LCR și se calculează indexul de anticorpi LCR/ser.

Ce face analiza. Analiza detectează direct ADN-ul de Borrelia în LCR, prin PCR în timp real. Sensibilitatea ei în LCR este însă mică: ADN-ul bacteriei se găsește doar la o mică parte dintre pacienții cu neuroborrelioză. De aceea, PCR-ul din LCR este o metodă complementară serologiei, nu o metodă de primă intenție.

Indicații

• Completarea diagnosticului de neuroborrelioză, în corelație cu tabloul clinic și cu serologia. Mayo Clinic Laboratories recomandă PCR-ul din LCR doar la pacienții care au:
  • anticorpi anti-Borrelia pozitivi în ser, confirmați prin imunoblot (IgG, IgM);
  • modificări ale LCR: proteine crescute și celule crescute (pleiocitoză).
• Suspiciunea de neuroborrelioză foarte precoce, înainte ca anticorpii să apară în LCR, când PCR-ul poate fi uneori pozitiv.

Analiza nu se folosește pentru screeningul persoanelor fără simptome.

Pregătirea pacientului

• Nu este necesară o pregătire specială din partea pacientului.
• LCR-ul se recoltează de medic, prin puncție lombară, în condiții sterile.
• Se recomandă ca, în același timp, să se recolteze și sânge pentru serologie, astfel încât anticorpii să fie determinați în paralel în ser și în LCR.

Recoltare

Metodă

PCR în timp real (real-time PCR), pentru detectarea ADN-ului de Borrelia burgdorferi sensu lato.

Valori de referință

Rezultatul se exprimă calitativ: pozitiv (ADN detectat) sau negativ (ADN nedetectat).

Interpretarea rezultatelor

Rezultat pozitiv. Arată prezența ADN-ului de Borrelia în LCR. Susține diagnosticul de neuroborrelioză, în corelație cu tabloul clinic, cu modificările LCR și cu serologia. Specificitatea testului este foarte mare: într-un studiu pe copii, PCR-ul nu a fost pozitiv la niciun pacient cu alte boli neurologice.

Rezultat negativ. Nu exclude neuroborrelioza. Sensibilitatea PCR-ului din LCR este mică:

• într-un studiu pe copii cu neuroborrelioză, ADN-ul de Borrelia a fost detectat doar la 5% dintre pacienți;
• substanțele care inhibă reacția pot da și ele rezultate fals negative.

Când suspiciunea clinică este mare, se recomandă serologia din LCR: determinarea simultană a anticorpilor în ser și în LCR, cu calculul indexului de anticorpi LCR/ser.

Rezultatul se interpretează de medic (neurolog, infecționist), împreună cu examenul clinic, analiza LCR și serologia Borrelia.

Limite și interferențe

• Sensibilitatea în LCR este mică. Un rezultat negativ nu exclude infecția. Ghidurile IDSA/AAN/ACR 2020 recomandă, pentru neuroborrelioză, testarea anticorpilor din ser și indexul de anticorpi LCR/ser, nu PCR-ul sau cultura din LCR, ca metodă principală.
• PCR-ul nu este un test de diagnostic de sine stătător. Rezultatele se folosesc ca ajutor în diagnostic, împreună cu clinica și serologia.
• Substanțele inhibitoare din probă pot da rezultate fals negative.
• Alte infecții transmise de căpușe pot apărea în același timp și nu sunt detectate de acest test. Exemple: Anaplasma, Ehrlichia (evaluabile prin anticorpi anti-Ehrlichia/Anaplasma sau Ehrlichia ADN-PCR), Babesia, Borrelia miyamotoi.
• Recoltarea sau păstrarea necorespunzătoare a probei poate invalida rezultatul.

Bibliografie:

1. Mayo Clinic Laboratories. Lyme Disease, Molecular Detection, PCR, Varies (LYMPV, 618310). Test Catalog.
2. Skogman BH, Wilhelmsson P, Atallah S, et al. Lyme neuroborreliosis in Swedish children – PCR as a complementary diagnostic method for detection of Borrelia burgdorferi sensu lato in cerebrospinal fluid. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2021;40(5):1003–1012. doi:10.1007/s10096-020-04129-7
3. Lantos PM, Rumbaugh J, Bockenstedt LK, et al. Clinical Practice Guidelines by the IDSA, AAN, and ACR: 2020 Guidelines for the Prevention, Diagnosis and Treatment of Lyme Disease. Clin Infect Dis. 2021;72(1):e1–e48.
4. European Centre for Disease Prevention and Control (ECDC). Facts about Lyme borreliosis.
5. Sanchez E, Vannier E, Wormser GP, Hu LT. Diagnosis, Treatment, and Prevention of Lyme Disease, Human Granulocytic Anaplasmosis, and Babesiosis: A Review. JAMA. 2016;315(16):1767–1777. doi:10.1001/jama.2016.2884 (abstract)