Ehrlichia ADN-PCR in sange

Ehrlichia / Anaplasma – ADN (PCR)

Ce este analiza

Analiza caută prin PCR materialul genetic (ADN) al bacteriilor din genurile Ehrlichia și Anaplasma în sânge. Aceste bacterii se transmit prin mușcătura de căpușă și infectează globulele albe. Infecțiile produse se numesc ehrlichioză și anaplasmoză.

Speciile principale:

• Anaplasma phagocytophilum:
  • produce anaplasmoza granulocitară umană;
  • infectează neutrofilele;
  • este specia cea mai frecventă în Europa, inclusiv în România;
  • se transmite prin căpușa Ixodes ricinus, aceeași care transmite boala Lyme;
• Ehrlichia chaffeensis:
  • infectează monocitele;
  • se întâlnește mai ales în America de Nord;
• Ehrlichia canis:
  • produce în special boala la câini;
  • la om, infecțiile sunt rare.

În interiorul globulelor albe, bacteriile formează mici colonii (morule), care se pot vedea uneori pe frotiul de sânge.

Simptomele apar de obicei la 1–2 săptămâni după mușcătura de căpușă:

• febră, frisoane;
• dureri de cap și dureri musculare;
• oboseală.

La analize apar frecvent:

• trombocite scăzute;
• globule albe scăzute;
• transaminaze crescute.

Formele severe pot semăna cu o meningoencefalită, cu o septicemie, cu o hepatită sau cu o boală malignă a sângelui. Ele apar mai ales la vârstnici și la persoanele cu imunitate scăzută.

De ce se face PCR

În prima săptămână de boală, organismul nu a produs încă anticorpi. De aceea, analiza de anticorpi este adesea negativă la început. PCR-ul detectează direct bacteria în sânge și este metoda cea mai sensibilă în prima săptămână de boală, înainte de începerea antibioticelor. Un rezultat pozitiv arată o infecție activă.

Indicații

• Febră și simptome asemănătoare gripei în primele zile după o mușcătură de căpușă sau după șederea în păduri ori zone cu iarbă înaltă.
• Febră cu trombocite și globule albe scăzute și transaminaze crescute fără o altă cauză, mai ales primăvara și vara.
• Suspiciunea de anaplasmoză sau ehrlichioză cu anticorpi încă negativi.
• Pacienții cu imunitate scăzută, la care anticorpii pot să nu apară.

Pregătirea pacientului

Nu este necesară o pregătire specială.

Momentul recoltării. Recoltarea se face, ideal, înainte de începerea tratamentului antibiotic. Antibioticul nu se amână însă pentru recoltare.

Ce comunicați medicului:

• data mușcăturii de căpușă;
• data apariției simptomelor;
• eventualul tratament antibiotic început.

Recoltare

Metodă

PCR (reacție de polimerizare în lanț).

Valori de referință

ADN de Ehrlichia / Anaplasma nedetectabil.

Interpretarea rezultatelor

ADN detectat: confirmă o infecție activă cu Anaplasma sau Ehrlichia.

ADN nedetectat: nu s-a găsit ADN bacterian în probă. Un rezultat negativ nu exclude infecția, mai ales în trei situații:

• proba a fost recoltată după începerea antibioticului. Sensibilitatea PCR scade mult în primele 48 de ore de tratament;
• proba a fost recoltată târziu, după prima săptămână de boală;
• cantitatea de bacterii din sânge era sub limita de detecție a metodei.

În aceste situații, diagnosticul se poate confirma prin anticorpi, pe două probe recoltate la 2–10 săptămâni distanță. Confirmarea se face prin creșterea de cel puțin 4 ori a titrului IgG.

Limite și interferențe

Tratamentul nu se amână în așteptarea rezultatului și nu se oprește din cauza unui rezultat negativ. Tratamentul se începe pe baza suspiciunii clinice.

Antibioticele (în special doxiciclina) luate înainte de recoltare scad mult șansa de detectare a bacteriei.

Sângele recoltat pe heparină nu este acceptat, deoarece heparina inhibă reacția PCR.

Frotiul de sânge poate arăta morulele în globulele albe în prima săptămână de boală. Nu este însă suficient de sensibil pentru a fi folosit singur.

Bibliografie:

1. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Clinical Testing and Diagnosis for Ehrlichiosis.
2. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Clinical Testing and Diagnosis for Anaplasmosis.