cANCA – Anticorpi anti citoplasma neutrofilelor PR3

Anticorpi anti-proteinază 3 (anti-PR3, c-ANCA)

Ce sunt anticorpii anti-proteinază 3

ANCA (anticorpii anti-citoplasmă neutrofilică) sunt autoanticorpi îndreptați împotriva unor proteine din neutrofile. Ei sunt markerii de diagnostic ai vasculitelor asociate ANCA, un grup de boli autoimune în care inflamația afectează vasele de sânge mici. Despre aceste boli găsiți mai multe în articolul despre anticorpii ANCA (p-ANCA, c-ANCA, MPO, PR3).

Țintele principale ale ANCA sunt două:

• proteinaza 3 (PR3), o enzimă din granulele primare ale neutrofilelor și din lizozomii monocitelor;
• mieloperoxidaza (MPO).

Anticorpii anti-PR3 caracterizează granulomatoza cu poliangeită (GPA), denumită anterior granulomatoza Wegener. GPA afectează în principal:

• căile respiratorii superioare (nas, sinusuri, urechi);
• plămânii;
• rinichii.

Testarea prin imunofluorescență. La testarea ANCA prin imunofluorescență indirectă, pe neutrofile umane fixate cu etanol, anticorpii anti-PR3 dau de obicei un aspect citoplasmatic (c-ANCA): fluorescență granulară difuză în citoplasmă, accentuată între lobii nucleului.

Ce face testul anti-PR3. Testul identifică precis antigenul țintă și măsoară cantitativ anticorpii. Ghidurile actuale îl recomandă, împreună cu anticorpii anti-MPO, ca metodă principală de testare ANCA.

Indicații

Anticorpii anti-PR3 se determină împreună cu anticorpii anti-MPO (p-ANCA) pentru:

• evaluarea pacienților cu suspiciune de vasculită asociată ANCA, mai ales când există:
  • glomerulonefrită, în special glomerulonefrită rapid progresivă, care se poate evalua prin creatinină și examenul complet de urină;
  • hemoragie pulmonară, în special sindrom pulmo-renal;
  • vasculită cutanată cu manifestări sistemice;
  • noduli pulmonari multipli;
  • boală cronică distructivă a căilor respiratorii superioare;
  • sinuzită sau otită de lungă durată;
  • stenoză traheală subglotică;
  • mononevrită multiplă sau altă neuropatie periferică;
  • masă retroorbitară;
  • sclerită;
• diferențierea granulomatozei cu poliangeită de celelalte forme de vasculită asociată ANCA: poliangeita microscopică și granulomatoza eozinofilică cu poliangeită;
• confirmarea unui rezultat ANCA pozitiv la imunofluorescență, mai ales cu aspect c-ANCA;
• urmărirea răspunsului la tratament la pacienții cu anticorpi anti-PR3, întotdeauna împreună cu evaluarea clinică.

Pregătirea pacientului

Nu este necesară o pregătire specială. Recoltarea se poate face à jeun (pe nemâncate) sau după masă.

Recoltare

Metodă

Imunoenzimatică (ELISA).

Rezultatul se exprimă în unități arbitrare (U/mL). Nu există un preparat internațional de referință pentru anti-PR3.

Valori de referință

Intervalul de măsurare este 0–100 U/mL.

Interpretarea rezultatelor

Rezultat pozitiv. Anticorpii anti-PR3 sunt foarte specifici pentru granulomatoza cu poliangeită. Prin prospectul kitului, specificitatea a fost de 98,8%, iar sensibilitatea de 83,6% la pacienții cu boală Wegener (c-ANCA pozitivi). În studiul european EUVAS, la pacienții nou diagnosticați cu GPA:

• imunotestele anti-PR3 au avut o sensibilitate de 77–81%;
• specificitatea față de alte boli a fost de 98–99%.

Contextul clinic:

• Un rezultat anti-PR3 pozitiv, împreună cu aspectul c-ANCA la imunofluorescență și cu un tablou clinic sugestiv, susține diagnosticul de GPA. În criteriile de clasificare ACR/EULAR 2022 pentru GPA, pozitivitatea c-ANCA sau anti-PR3 aduce +5 puncte, iar pozitivitatea p-ANCA sau anti-MPO scade scorul cu un punct.
• Nivelul anticorpilor contează: valorile mai mari cresc probabilitatea unei vasculite asociate ANCA.
• În poliangeita microscopică, anti-PR3 sunt rari: sensibilitate de 5–9% la nou diagnosticați. Aici predomină anticorpii anti-MPO. Și în granulomatoza eozinofilică cu poliangeită (fostul sindrom Churg-Strauss) ANCA sunt mai rari, iar tipul predominant este tot anti-MPO.

Diagnosticul nu se pune doar pe baza anticorpilor. Un rezultat pozitiv nu este diagnostic prin el însuși. Diagnosticul se stabilește de medic, pe baza tabloului clinic, a imagisticii și, de regulă, a biopsiei. Înainte de diagnostic trebuie excluse infecțiile care pot imita o vasculită, cum ar fi endocardita infecțioasă, hepatita C și tuberculoza.

Urmărirea în timp:

• Nivelul anticorpilor anti-PR3 poate scădea sub tratament și fluctuează adesea odată cu activitatea bolii.
• Pacienții cu anti-PR3 pozitivi la diagnostic au un risc mai mare de recădere decât cei cu anti-MPO.
• Persistența anticorpilor în remisiune, creșterea lor sau repozitivarea au fost asociate cu riscul de recădere.
• Totuși, deciziile de tratament nu se iau doar pe baza nivelului de anticorpi, ci pe baza evaluării clinice structurate (ghidul EULAR 2022).

Analize care se fac împreună. Pentru evaluarea activității bolii și a afectării organelor, medicul poate recomanda:

• proteina C reactivă și VSH;
• creatinina;
• examenul complet de urină, pentru hematurie și proteinurie;
• anticorpii anti-membrană bazală glomerulară, în glomerulonefrita rapid progresivă și în sindromul pulmo-renal.

Limite și interferențe

• Un rezultat negativ nu exclude vasculita asociată ANCA. În studiul EUVAS, 9–16% dintre pacienții cu vasculită asociată ANCA au fost negativi la imunotest. ANCA sunt pozitivi la până la 90% dintre pacienții cu GPA generalizată activă, dar doar la aproximativ 40% dintre cei cu formă localizată.
• Dacă anti-PR3 și anti-MPO sunt negativi, dar suspiciunea clinică rămâne mare, se recomandă o a doua metodă: alt imunotest sau imunofluorescența indirectă.
• Rezultatele în U/mL depind de metodă și nu pot fi comparate direct între laboratoare care folosesc kituri diferite. Pentru urmărirea în timp se recomandă același laborator.
• Interferențe analitice (după prospectul kitului): hemoliza (hemoglobină până la 1.000 mg/dL), lipemia (trigliceride până la 3 g/dL) și bilirubina (până la 40 mg/dL) nu influențează rezultatul. Probele puternic hemolizate sau lipemice se evită totuși.
• Congelarea și decongelarea repetată pot duce la pierderea activității anticorpilor. Nu se recomandă testarea serului inactivat termic.

Bibliografie:

1. ORGENTEC Diagnostika GmbH. Anti-PR3 (ORG 218) – instrucțiuni de utilizare, ORG 218_IFU_EN_QM113064, versiunea 5, 2024-07-17.
2. Mayo Clinic Laboratories. Proteinase 3 Antibodies, IgG, Serum (PR3, 82965). Test Catalog.
3. Labcorp. Antiproteinase 3 (PR3) Antibodies (163067). Test Menu.
4. Bossuyt X, Cohen Tervaert JW, Arimura Y, et al. Position paper: Revised 2017 international consensus on testing of ANCAs in granulomatosis with polyangiitis and microscopic polyangiitis. Nat Rev Rheumatol. 2017;13(11):683–692.
5. Hellmich B, Sanchez-Alamo B, Schirmer JH, et al. EULAR recommendations for the management of ANCA-associated vasculitis: 2022 update. Ann Rheum Dis. 2024;83(1):30–47. doi:10.1136/ard-2022-223764
6. Robson JC, Grayson PC, Ponte C, et al. 2022 American College of Rheumatology/European Alliance of Associations for Rheumatology classification criteria for granulomatosis with polyangiitis. Ann Rheum Dis.2022;81(3):315–320.
7. de Souza AWS. Autoantibodies in Systemic Vasculitis. Front Immunol. 2015;6:184. doi:10.3389/fimmu.2015.00184