Anticorpi anti neuronali(Amfifizina, CV2, PNMA2 (Ma2/Ta), Ri, Yo, Hu, Recoverin, SOX1)

Profil anticorpi antineuronali – Blot (amfifizină, CV2, PNMA2 (Ma2/Ta), Ri, Yo, Hu, recoverină, SOX1)

Ce este analiza

Anticorpii antineuronali sunt autoanticorpi asociați sindroamelor neurologice paraneoplazice. Acestea sunt afecțiuni neurologice care însoțesc un cancer, dar nu sunt produse direct de tumoră, de metastaze, de cauze vasculare, de infecții sau de efectele adverse ale tratamentului. Apar prin mecanisme imune: sistemul imunitar produce anticorpi împotriva unor antigene ale tumorii, iar aceiași anticorpi atacă structuri asemănătoare din sistemul nervos, la distanță de tumoră.

Analiza profil anticorpi antineuronali – Blot detectează simultan, într-o singură probă de ser, opt autoanticorpi antineuronali:

• anti-amfifizină;
• anti-CV2;
• anti-PNMA2 (Ma2/Ta);
• anti-Ri;
• anti-Yo;
• anti-Hu;
• anti-recoverină;
• anti-SOX1.

Anticorpii poartă fie numele pacientului la care au fost descriși prima dată (Hu, Yo, Ma), fie denumirea aspectului lor la imunohistochimie, de exemplu ANNA (anticorpi antinucleari antineuronali).

Sindroamele neurologice paraneoplazice apar la aproximativ 15% dintre pacienții cu cancer. Cel mai des se asociază cu cancerul pulmonar cu celule mici, cu cancerul de sân și cu cel ovarian, dar și cu alte tumori, de exemplu gastrice. Peste două treimi dintre pacienții cu sindrom paraneoplazic au anticorpi specifici în ser.

Simptomele neurologice pot apărea înaintea descoperirii cancerului, uneori cu săptămâni sau ani. De aceea, detectarea anticorpilor poate duce la identificarea precoce a tumorii. În funcție de sindrom, valoarea predictivă a anticorpilor diferă:

• În sindromul miastenic Lambert-Eaton, detectarea anticorpilor prezice cel mai bine prezența unui cancer pulmonar cu celule mici.
• În celelalte sindroame paraneoplazice, un anticorp pozitiv se corelează mai bine cu tumora subiacentă decât cu simptomele clinice. Exemple sunt:
  • encefalita limbică;
  • degenerescența cerebeloasă;
  • sindromul opsoclonus-mioclonus-ataxie;
  • sindromul omului rigid (stiff person);
  • retinopatia paraneoplazică.

Criteriile internaționale actuale (2021) împart anticorpii în două categorii:

• cu risc înalt, când se asociază cu un cancer în peste 70% din cazuri;
• cu risc intermediar, când asocierea cu un cancer este de 30–70%.

În afara sindromului opsoclonus-mioclonus, diagnosticul sigur de sindrom neurologic paraneoplazic necesită prezența unui anticorp cu risc înalt sau intermediar.

Sindroamele neurologice paraneoplazice pot apărea și în contextul unor boli autoimune, de exemplu în diabetul zaharat de tip 1. Anticorpii anti-GAD sunt relevanți atât pentru diabet, cât și pentru sindromul omului rigid, care se poate asocia cu limfomul Hodgkin.

Anticorpii din profil

Alți anticorpi antineuronali, care nu fac parte din acest profil, pot fi determinați separat:

• anticorpi anti-Tr, în degenerescența cerebeloasă asociată limfomului Hodgkin;
• anticorpii anti-GAD, în sindromul omului rigid;
• anticorpii anti-titină, în miastenia gravis asociată timomului.

Indicații

• Suspiciune de sindrom neurologic paraneoplazic, mai ales la pacienți cu simptome neurologice instalate subacut, în săptămâni sau luni, fără altă cauză evidentă. Exemple de astfel de simptome sunt:
  • tulburări de memorie, confuzie, crize epileptice (encefalită limbică);
  • tulburări de echilibru și de coordonare, vorbire dificilă (degenerescență cerebeloasă);
  • mișcări involuntare ale ochilor și mioclonii (opsoclonus-mioclonus);
  • amorțeli și tulburări de sensibilitate (neuropatie senzitivă);
  • slăbiciune musculară de tip miastenic (sindrom Lambert-Eaton);
  • rigiditate musculară (sindromul omului rigid);
  • scăderea bruscă a vederii (retinopatie paraneoplazică).
• Căutarea unui cancer ascuns la pacienții cu sindrom neurologic sugestiv.
• Pacienți cu cancer cunoscut care dezvoltă simptome neurologice neexplicate.

Analiza se poate completa cu:

• panelul de anticorpi antineuronali de suprafață, pentru encefalitele autoimune;
• anticorpii anti-receptor NMDA;
• anticorpii anti-LGI1;
• anticorpii anti-receptor GABA-B;
• anticorpii anti-receptor de acetilcolină;
• benzile oligoclonale și indexul IgG LCR/ser.

Pregătirea pacientului

Recoltarea se poate face à jeun (pe nemâncate) sau după masă.

Menționați laboratorului dacă aveți un diagnostic de cancer, dacă urmați tratament oncologic (inclusiv imunoterapie) sau tratament imunosupresor.

Recoltare

Metodă

Imunoblot (strip). Antigenele sunt fixate în benzi paralele pe o membrană.

1. Banda se incubează cu serul pacientului.
2. După spălare, se adaugă un conjugat anti-IgG umană marcat cu fosfatază alcalină.
3. Se spală din nou și se adaugă un substrat cromogen.
4. Anticorpii legați apar ca benzi albastru-închis.

Fiecare bandă are o bandă de control. Colorarea ei intensă confirmă că testul s-a desfășurat corect. Benzile se scanează și se evaluează cu un program dedicat, care acordă puncte în funcție de intensitatea semnalului.

Valori de referință

Negativ, pentru fiecare anticorp: amfifizină, CV2, PNMA2 (Ma2/Ta), Ri, Yo, Hu, recoverină, SOX1.

Interpretarea rezultatelor

Rezultat pozitiv. Confirmă prezența anticorpilor specifici. La un pacient cu simptome neurologice compatibile, rezultatul susține diagnosticul de sindrom neurologic paraneoplazic și orientează căutarea tumorii, în funcție de anticorpul detectat (vezi tabelul de mai sus).

Rezultat echivoc. Prezența anticorpilor este incertă. Testul se repetă după 1–2 luni, în funcție de contextul clinic.

Rezultat negativ. Nu au fost detectați anticorpii specifici din profil.

Conform recomandărilor Societății Germane de Neurologie, anticorpii antineuronali se determină prin cel puțin două metode:

• screening prin imunofluorescență indirectă;
• confirmare prin imunoblot.

Rezultatul are valoare diagnostică atunci când cele două metode concordă și corespund tabloului clinic. Rezultatul se interpretează de medicul neurolog, împreună cu examenul clinic, imagistica (RMN, CT, PET-CT) și, la nevoie, cu examenul lichidului cefalorahidian.

Limite și interferențe

• Profilul detectează doar anticorpii incluși în panel. Alți anticorpi antineuronali se determină separat.
• Un rezultat echivoc nu permite o concluzie și necesită repetarea testului.
• Probele intens hemolizate, lipemice sau puternic contaminate bacterian nu se lucrează.

Bibliografie

1. Graus F, Vogrig A, Muñiz-Castrillo S, et al. Updated diagnostic criteria for paraneoplastic neurologic syndromes. Neurol Neuroimmunol Neuroinflamm. 2021;8(4):e1014. doi: 10.1212/NXI.0000000000001014
2. MSD Manual Professional Version. Paraneoplastic Syndromes.