Cariotip in mucoasa coriala

Analiza cromozomială din vilozități coriale / produs de concepție (cariotip)

Ce este analiza cromozomială din vilozități coriale sau din produs de concepție

Analiza cromozomială (cariotipul) arată numărul și structura cromozomilor din celulele fătului. Se poate face în două situații:

• Diagnosticul prenatal, din vilozități coriale. Vilozitățile coriale sunt țesut din placenta în formare, care are de obicei aceeași structură genetică ca fătul. Se recoltează prin biopsie de vilozități coriale (BVC), la 10–13 săptămâni de sarcină. Medicul obstetrician introduce, sub control ecografic, un ac prin peretele abdominal sau un cateter prin colul uterin. BVC permite un diagnostic mai precoce decât amniocenteza.
• După pierderea unei sarcini, din produsul de concepție. Analiza poate explica de ce s-a pierdut sarcina. Anomaliile cromozomiale stau la baza a până la 50% dintre avorturile spontane, iar 10–15% dintre sarcinile recunoscute clinic se termină prin avort spontan. Cele mai frecvente anomalii sunt:
  • trisomiile (de exemplu, 16, 18, 21);
  • monosomia X;
  • triploidia.

Cum se face analiza. Celulele din probă sunt cultivate, apoi cromozomii sunt colorați prin tehnica de bandare G și examinați la microscop. Analiza poate detecta:

• anomaliile numerice: trisomii (de exemplu, sindromul Down), monosomii, triploidii;
• anomaliile structurale mari: translocații, inversii, deleții sau duplicații vizibile la microscop.

Indicații

Diagnosticul prenatal (vilozități coriale):

• rezultat cu risc crescut la screeningul prenatal, de exemplu la dublul test sau la NIPT;
• anomalii descoperite la ecografie;
• un copil anterior cu o anomalie cromozomială sau cu o malformație;
• vârsta înaintată a mamei sau a tatălui;
• un părinte purtător al unei rearanjări cromozomiale, de exemplu o translocație echilibrată.

Produsul de concepție:

• pierderea unei sarcini, mai ales în cazul pierderilor de sarcină repetate;
• moartea fătului în uter.

Analiza se recomandă de medicul obstetrician sau de medicul genetician, cu consiliere genetică.

Pregătirea pacientului

• Vilozitățile coriale se recoltează de medicul obstetrician, prin procedură invazivă, sub control ecografic. Înainte de procedură, la gravidele Rh negative se evaluează necesitatea administrării imunoglobulinei anti-D.
• Produsul de concepție se recoltează de medicul ginecolog, după pierderea sarcinii.
• Documente: proba se trimite însoțită de formularul de consimțământ pentru analize genetice.

Recoltare

Important: proba nu se congelează și nu se pune în formol, deoarece celulele trebuie să rămână vii pentru cultură. Transportul se face la temperatura camerei, cât mai repede după recoltare.

Metodă

Cariotip clasic, prin bandare G, pe celule cultivate:

• se pornesc trei culturi independente. Două sunt analizate, iar a treia rămâne în incubator, ca rezervă;
• de regulă, se examinează cel puțin 6 colonii celulare (maximum 12) și 15–20 de metafaze, dintre care 10 sunt cariotipate.

Valori de referință

• Cariotip normal feminin: 46,XX.
• Cariotip normal masculin: 46,XY.

Interpretarea rezultatelor

Cariotip normal (46,XX sau 46,XY). Nu au fost identificate anomalii cromozomiale numerice sau structurale mari. Un cariotip normal nu exclude:

• microdelețiile și microduplicațiile, prea mici pentru a fi văzute la microscop;
• bolile monogenice;
• malformațiile fără cauză cromozomială.

Cariotip anormal.

• În diagnosticul prenatal, rezultatul se discută cu medicul genetician și cu medicul obstetrician, în cadrul consilierii genetice.
• După o pierdere de sarcină, rezultatul poate explica pierderea. Dacă se găsește o anomalie structurală (de exemplu, o translocație dezechilibrată), se recomandă cariotipul părinților. Ei pot fi purtători ai unei rearanjări echilibrate, care crește riscul în sarcinile viitoare.

Mozaicismul. Uneori, în vilozitățile coriale se găsesc două linii celulare diferite (mozaicism), la aproximativ 1–2% dintre probe. De cele mai multe ori, anomalia este limitată la placentă (mozaicism placentar confinat). Fătul este afectat doar în aproximativ 10% dintre aceste cazuri. Pentru confirmare se recomandă amniocenteza în trimestrul al doilea. Mozaicismul placentar se poate asocia cu complicații ale sarcinii, cum sunt restricția de creștere fetală sau hipertensiunea maternă.

Cariotip 46,XX din produs de concepție. Poate reflecta contaminarea cu țesut matern (decidua) și nu neapărat cariotipul fătului. Interpretarea se face cu prudență.

Limite și interferențe

• Cultura celulară poate eșua, mai ales la produsul de concepție, unde țesutul este adesea necrozat sau contaminat. Într-un studiu, cariotipul a eșuat la 28 din 100 de probe, iar alte studii raportează eșecuri de până la 40%. Probele vechi, necrozate sau contaminate cresc riscul de eșec.
• Contaminarea cu celule materne poate da un rezultat fals normal feminin (46,XX).
• Mozaicismul placentar confinat poate da un rezultat care nu reflectă cariotipul fătului.
• Rezoluția este limitată. Cariotipul nu detectează microdelețiile și microduplicațiile. Cariotipul molecular (array CGH):
  • lucrează pe ADN, fără cultură celulară;
  • evită eșecul culturii și contaminarea cu celule materne;
  • detectează anomalii suplimentare semnificative la aproximativ 1,7% dintre fetușii cu ecografie normală și la aproximativ 6% dintre cei cu anomalii ecografice.
• Riscul procedurii. BVC efectuată după 10 săptămâni are un risc de pierdere a sarcinii de aproximativ 0,22% (1 din 455). Riscul de defecte de reducere a membrelor nu diferă semnificativ de cel din populația generală, dar crește dacă BVC se face mai devreme de 10 săptămâni.