Dublu test Kryptor (PAPP-A, free beta-hCG)

Ce este dublul test

Dublul test, numit și bitest, este o investigație de screening din primul trimestru de sarcină. Estimează riscul de anomalii cromozomiale la făt. Profilul include cele două teste biochimice folosite în screeningul prenatal din trimestrul I:

• free beta-hCG, subunitatea beta liberă a gonadotropinei corionice umane (hCG);
• PAPP-A, proteina plasmatică A asociată sarcinii.

Testul estimează riscul pentru trei anomalii cromozomiale:

Dublul test este un test de screening. Rezultatul nu este un diagnostic, ci arată doar riscul ca fătul să aibă una dintre aceste anomalii cromozomiale.

Când se face

Perioada ideală este între săptămânile 11 și 14 de sarcină, atât pentru analiza de sânge, cât și pentru ecografia de translucență nucală. Rezultatele dublului test se interpretează doar împreună cu această ecografie, făcută tot în primul trimestru. La ecografie se măsoară lungimea cranio-caudală a fătului și lichidul din regiunea cefei (translucența nucală) și se urmărește prezența osului nazal.

Screeningul nu este obligatoriu, dar este recomandat tuturor gravidelor, mai ales în următoarele situații:

• vârsta mamei peste 35 de ani;
• istoric familial de boli genetice;
• un copil născut anterior cu malformații congenitale.

Recoltare

Metodă

Imunochimică, cu tehnologie TRACE (Time Resolved Amplified Cryptate Emission), pe analizorul KRYPTOR (BRAHMS – Thermo Scientific).

Tehnologia TRACE:

• Principiu: folosește fluorescența și permite determinarea analiților în fază omogenă.
• Originea: a fost dezvoltată pornind de la cercetările chimistului francez Jean-Marie Lehn, laureat al Premiului Nobel pentru chimie în 1987, și adaptată ulterior pentru sistemul KRYPTOR.

Cum funcționează:

• Metoda „sandwich”: fiecare dintre cei doi parametri (free beta-hCG și PAPP-A) se măsoară cu doi anticorpi monoclonali. Unul este marcat cu o moleculă donor (criptat de europiu), celălalt cu o moleculă acceptor (XL665).
• Transferul de energie: când se formează complexul imun, energia trece de la molecula donor la cea acceptor, fără emisie de radiație (transfer nonradiant).
• Măsurarea: fluorescența specifică emisă de complexe este proporțională cu cantitatea de antigen din probă. Se obține printr-o dublă selecție:
  • spectrală, adică separarea în funcție de lungimea de undă;
  • temporală, adică măsurători cu rezoluție în timp („time resolved measurement”).

Certificarea FMF: datorită preciziei și reproductibilității foarte bune a rezultatelor, platforma KRYPTOR este certificată de Fetal Medicine Foundation (FMF, Marea Britanie) pentru screeningul prenatal neinvaziv.

Cum se calculează riscul

Laboratorul furnizează valorile free beta-hCG și PAPP-A. Riscul de anomalii cromozomiale îl calculează medicul specialist în obstetrică-ginecologie, în programul Astraia, cu algoritmul elaborat de Fetal Medicine Foundation. În calcul intră valorile celor doi markeri, vârsta mamei, datele ecografiei din trimestrul I și datele clinice ale gravidei.

Interpretarea rezultatelor

• Risc scăzut: riscul calculat este sub limita de risc stabilită.
• Risc crescut: riscul calculat depășește limita de risc, de exemplu un raport între 1:10 și 1:250 pentru trisomia 21.
• În trisomia 21: PAPP-A este de regulă scăzut, iar free beta-hCG crescut (peste 2 MoM).

După un rezultat cu risc crescut:

• consult genetic;
• teste invazive de diagnostic: amniocenteza sau biopsia de vilozități coriale (coriocenteza);
• analiză genetică: cariotip din lichid amniotic, vilozități coriale sau produs de concepție.

Limite și interferențe

• Dublul test este un test de screening. Un rezultat cu risc crescut nu înseamnă că fătul are o anomalie cromozomială.
• Un rezultat cu risc scăzut nu garantează absența anomaliilor cromozomiale.
• Rezultatul are valoare doar interpretat împreună cu ecografia de translucență nucală din trimestrul I.