Imunoglobulina E totală (IgE) Ce este IgE totală Imunoglobulinele E (IgE) sunt anticorpi care se leagă prin fragmentul…
Hepatite
HBV ADN- cantitativ (incarcatura virala)
Despre analiza
HBV ADN- cantitativ (incarcatura virala)
Ce este HBV ADN- cantitativ (incarcatura virala)
Testul măsoară cantitatea de material genetic (ADN) al virusului hepatitei B (VHB) din plasmă, adică viremia B sau încărcătura virală. Este cea mai directă metodă de a afla cât de activ se multiplică virusul.
Hepatita B, o problemă încă actuală
Vaccinurile eficiente împotriva hepatitei B există din 1982, dar infecția rămâne o problemă gravă de sănătate publică:
- peste 2 miliarde de oameni din lume au dovezi serologice ale infecției, actuale sau din trecut;
- aproximativ 257 de milioane au infecție cronică, definită prin prezența antigenului HBs;
- în 2015 au murit 887.000 de persoane, mai ales din cauza complicațiilor: ciroza hepatică și cancerul hepatocelular.
Virusul are 9 genotipuri, notate de la A la I, și mai multe subgenotipuri, cu distribuție geografică diferită. Ele se pot identifica prin genotiparea VHB.
De ce viremia și nu doar markerii serologici
Markerii serologici se folosesc des pentru diagnosticul și prognosticul hepatitei B acute sau cronice. Dintre ei, antigenul HBe arată că pacientul este contagios și că virusul se replică activ, ceea ce se asociază cu boală hepatică progresivă.
AgHBe are însă o limită importantă. Există tulpini virale care fie produc AgHBe, dar acesta nu poate fi detectat în ser, fie și-au pierdut capacitatea de a-l produce, deși infecția este activă. La acești pacienți, AgHBe negativ nu înseamnă că virusul s-a oprit.
Viremia măsurată prin PCR ocolește această problemă și are cea mai mare valoare prognostică, atât în infecția acută, cât și în cea cronică. În plus, poate detecta virusul și în hepatita cronică B cu markeri serologici negativi.
Ce aduce testul
| Situație | Utilitate |
|---|---|
| Infecția recentă | ADN-ul VHB apare în sânge la aproximativ 30 de zile de la contact, înaintea AgHBs; poate detecta precoce infecția acută la persoanele cu risc crescut |
| Tratamentul antiviral | o scădere rapidă și susținută a ADN-VHB sub interferon α pegilat (PegIFNα) sau sub analogi nucleozidici/nucleotidici anunță un răspuns bun la tratament |
| Rezistența la tratament | monitorizarea viremiei poate anunța apariția rezistenței la analogi nucleozidici/nucleotidici |
Indicații
- Evaluarea replicării virale în hepatita B acută sau cronică.
- Depistarea precoce a infecției acute la persoanele cu risc crescut, înainte de apariția AgHBs.
- Hepatita cronică B cu markeri serologici negativi.
- Stabilirea fazei infecției cronice VHB, împreună cu markerii serologici și biochimici.
- Monitorizarea tratamentului antiviral și a posibilei rezistențe.
- Gravidele cu infecție VHB, pentru decizia de tratament profilactic.
Pregătirea pacientului
Nu este necesară o pregătire specială.
Recoltare
| Probă | Plasmă EDTA, congelată, probă individuală |
| Tub de recoltare | Eprubetă vidată K2EDTA de 5 mL, cu gel separator (capac alb) |
| Volum minim | O eprubetă de 5 mL |
| Pregătirea probei | 8–10 răsturnări ale eprubetei imediat după recoltare; centrifugare la 1100 g (RCF), 15 minute |
| Conservare | Plasma separată: 6 zile la 2–8 °C sau 3 luni la −20 °C |
| Probă neconformă | Recoltare pe heparină; probă coagulată sau hemolizată; volum insuficient; probă contaminată |
Important: proba se centrifughează, plasma se congelează și se trimite congelată, în eprubetă individuală.
Metodă
PCR în timp real (COBAS 8800): reacție de polimerizare în lanț, cu detecția în timp real a fragmentului amplificat prin măsurarea fluorescenței emise. Procesarea probelor este complet automatizată.
- Sensibilitate analitică: 4,4 UI/mL.
- Limita de cuantificare: 10 UI/mL.
- Transformarea unităților de măsură: ADN-VHB (UI/mL) × 5,82 = ADN-VHB (copii/mL).
Valori de referință
ADN-VHB: nedetectabil.
Interpretarea rezultatelor
Cum se citește rezultatul
| Rezultat | Semnificație |
|---|---|
| Nedetectabil | ADN-ul viral lipsește sau este sub limita de detecție a metodei |
| Detectabil, sub limita de cuantificare | virusul este prezent, dar în cantitate prea mică pentru a fi măsurat exact; testul se poate repeta după 1–2 luni, în funcție de contextul clinic |
| Valoare numerică | se exprimă în UI/mL și în log10 UI/mL |
O variație de 1 log10 UI/mL față de valoarea de bază înseamnă o creștere sau o scădere de 10 ori a viremiei.
Fazele infecției cronice VHB
Viremia se interpretează împreună cu markerii serologici, cu analizele biochimice și, la nevoie, cu biopsia hepatică. Asocierea lor arată faza infecției. Societatea Europeană pentru Studiul Ficatului (EASL) a schimbat denumirile acestor faze:
| Denumire nouă (EASL) | Denumire veche | AgHBs cantitativ | ADN-VHB (UI/mL) | TGP | Ficat (histologie) |
|---|---|---|---|---|---|
| Infecție cronică AgHBe pozitivă | toleranță imună | crescut | > 10⁷ | normal | normal sau inflamație minimă |
| Hepatită cronică AgHBe pozitivă | activitate imună | crescut / intermediar | 10⁴–10⁷ | crescut | inflamație cronică moderată sau severă |
| Infecție cronică AgHBe negativă (de obicei anti-HBe pozitiv) | purtător inactiv de AgHBs | scăzut | < 2000 | normal | normal |
| Hepatită cronică AgHBe negativă(de obicei anti-HBe pozitiv) | aceeași | intermediar | > 2000 | crescut | inflamație cronică moderată sau severă |
| Faza AgHBs negativă / infecție ocultă (anti-HBc pozitiv, ± anti-HBspozitiv) | – | nedetectabil sau foarte scăzut | de obicei nedetectabil în sânge (prezent în hepatocite) | normal | variabil, după momentul dispariției AgHBs |
Răspunsul la tratament (după ghidul EASL)
Scopul tratamentului antiviral este suprimarea ADN-VHB pe termen lung.
Sub analogi nucleozidici/nucleotidici:
| Situație | Definiție |
|---|---|
| Răspuns virusologic | ADN-VHB nedetectabil |
| Răspuns parțial | scădere cu peste 1 log10 UI/mL, dar încă detectabil după 12 luni de tratament, la un pacient care ia corect tratamentul |
| Lipsa răspunsului primar | scădere cu mai puțin de 1 log10 UI/mL după 3 luni de tratament |
| Reapariția viremiei („breakthrough”) | creștere cu peste 1 log10 UI/mL față de cea mai mică valoare obținută în timpul tratamentului |
Sub interferon α pegilat: răspunsul virusologic înseamnă ADN-VHB sub 2000 UI/mL, evaluat la 6 și la 12 luni.
Răspuns susținut fără tratament: ADN-VHB sub 2000 UI/mL, menținut cel puțin 12 luni după oprirea terapiei, indiferent dacă aceasta a fost cu analogi sau cu interferon.
În sarcină
Gravidele cu infecție VHB și ADN-VHB peste 200.000 UI/mL au indicație de tratament antiviral profilactic. Tratamentul începe în săptămânile 24–28 de sarcină și continuă în primele 12 săptămâni după naștere, pentru a preveni transmiterea la nou-născut.
Limite și interferențe
- Tipul de probă: testul este validat doar pentru plasma recoltată pe EDTA. Alte tipuri de probă pot da rezultate fals pozitive sau fals negative.
- Heparina inhibă reacția PCR.
Cum decurge
- 1Comanzi online sau vii directPentru analizele cu plata nu e nevoie de programare.
- 2Recoltezi in oricare centru NPAL–V 7:30–16:30 · Sambata 7:30–12:00
- 3Primesti rezultatul in portalValidat de medicul de laborator, cu notificare pe e-mail.