Hemocromatoza ereditara– secventierea genei HFE

Hemocromatoza ereditară – secvențierea genei HFE

Ce este secvențierea genei HFE

Hemocromatoza ereditară este cea mai frecventă boală genetică a metabolismului fierului. Intestinul absoarbe mai mult fier decât are nevoie organismul, iar surplusul se acumulează an de an în organe, mai ales în ficat, pancreas, inimă și glandele endocrine. Fierul depus în țesuturi produce leziuni oxidative și, în timp, afectează funcția organelor.

Când apare boala și ce complicații are

Simptomele apar de regulă:

• la bărbați: între 30 și 60 de ani (decadele a patra–a șasea de viață);
• la femei: după menopauză, pentru că pierderile fiziologice de fier din perioada fertilă întârzie acumularea.

Dacă boala nu este descoperită și tratată din timp, supraîncărcarea cu fier poate duce la:

• ciroză hepatică și cancer hepatocelular;
• diabet zaharat;
• cardiomiopatie și aritmii;
• artropatie.

Rolul genei HFE

Între 80% și 90% din cazurile de hemocromatoză ereditară sunt produse de variante patogene ale genei HFE.

Gena se află pe cromozomul 6 (6p22.2). Codifică o proteină de membrană din familia complexului major de histocompatibilitate de clasa I. Rolul ei este să ajute organismul să „măsoare” cât fier circulă în sânge. Interacționează cu receptorul transferinei (TfR1 și, indirect, TfR2) și reglează astfel producția de hepcidină, principalul hormon care controlează metabolismul fierului.

Când gena HFE este modificată, apare următorul lanț:

1. ficatul produce mai puțină hepcidină;
2. feroportina, proteina care trimite fierul din celule în sânge, devine mai activă;
3. intestinul absoarbe prea mult fier;
4. fierul se acumulează progresiv în țesuturi.

Variantele genei HFE

Hemocromatoza legată de HFE se transmite autozomal recesiv: boala apare când ambele copii ale genei sunt modificate.

Formele non-HFE

Un procent mic de pacienți au forme de hemocromatoză produse de alte gene implicate în reglarea fierului: HJV, HAMP, TFR2 sau SLC40A1. Aceste forme sunt mult mai rare și au mecanisme moleculare diferite. Pot debuta mai devreme sau se pot transmite altfel. Se caută mai ales la pacienții cu supraîncărcare severă cu fier la care analiza genei HFE a ieșit negativă.

De ce secvențiere completă

Față de testele care caută doar câteva mutații cunoscute, cum este testul pentru C282Y și H63D, secvențierea citește întreaga regiune codantă a genei HFE. Așa pot fi găsite atât variantele frecvente, cât și cele rare. Este metoda de elecție pentru confirmarea diagnosticului la pacienții cu suspiciune clinică și biochimică și pentru testarea rudelor aflate la risc. Caracterizarea moleculară completă permite un management adaptat fiecărui pacient.

Indicații

• Suspiciune de hemocromatoză ereditară, mai ales când:
  • saturația transferinei este persistent peste 45%;
  • feritina serică este crescută;
  • au fost excluse cauzele secundare de supraîncărcare cu fier.
• Membrii familiei aflați la risc, ai unui pacient cu hemocromatoză ereditară.

Pregătirea pacientului

• Nu este necesară o pregătire specială.
• Consimțământ: testarea se face numai după consimțământul informat al pacientului.

Recoltare

Metodă

PCR urmat de secvențiere bidirecțională a regiunii codante și a joncțiunilor exon–intron ale genei HFE.

Interpretarea rezultatelor

Testul poate arăta una dintre următoarele situații:

Homozigoția C282Y sau heterozigoția compusă C282Y/H63D, într-un context clinic și biologic sugestiv, susțin diagnosticul de hemocromatoză ereditară. Ele permit începerea din timp a tratamentului prin flebotomii terapeutice. Început înainte de afectarea organelor, tratamentul previne complicațiile ireversibile și are un prognostic favorabil.

Exemplu de rezultat:
Exon 2 – schimb nucleotidic c.187C>G, p.(His63Asp) – status: heterozigot.

Rezultatul se interpretează de medicul genetician, în cadrul unui consult de genetică. Se corelează cu sideremia, transferina și feritina.

Limite și interferențe

• Două variante heterozigote diferite. Metoda nu poate stabili dacă sunt pe același cromozom (cis) sau pe cromozomi diferiți (trans). Pentru a afla configurația și a evalua corect riscul, se recomandă testarea părinților sau a altor rude.
• Doar gena HFE. Testul nu include celelalte gene implicate în metabolismul fierului. Un rezultat negativ nu exclude complet o formă genetică de hemocromatoză.